Revista Farmespaña Industrial Enero Febrero 2026

de rutas inflamatorias, y otro con inflama- ción endógena para la simulación de un microambiente patológico sin necesidad de inducción externa. La validación de estas líneas se ha realiza- do mediante técnicas moleculares avanza- das como qPCR, western blot, secuenciación dirigida y ensayos funcionales de luciferasa, garantizando robustez y reproducibilidad. Una vez confirmada su funcionalidad, estas plataformas se han utilizado para evaluar biomoléculas naturales y compuestos pro- porcionados por empresas colaboradoras como Monteloeder y Terra Nova Foods, demostrando su utilidad como herramien- ta predictiva para la identificación de com- puestos con actividad antiinflamatoria. Además, estas líneas están preparadas para integrarse en modelos dinámicos como el intestino-en-chip y en sistemas tridimensio- nales, reduciendo tiempos de desarrollo y disminuyendo el uso de animales en fases preclínicas. Sistema dinámico: intestino-en-chip. Tras la fase de cribado, el proyecto evolucio- na hacia un modelo de intestino-en-chip que integra tecnologías de microfluídica y co-cultivos celulares, reproduciendo con- diciones fisiológicas más próximas al entor- no intestinal humano. Este enfoque permite simular gradientes dinámicos de flujo, inte- racciones célula-célula y exposición contro- lada a compuestos, ofreciendo una platafor- ma avanzada para estudios preclínicos. En Pharmanova II, el sistema se ha opti- mizado mediante la incorporación de una línea celular modificada que posibilita la monitorización in situ del biomarcador inflamatorio seleccionado y la evaluación directa de la respuesta frente a compues- tos bioactivos. El modelo permite controlar el flujo, la exposición a compuestos y las condiciones microambientales, así como analizar parámetros como secreción de citoquinas, expresión génica y viabili- dad celular. Todo ello proporciona datos en condiciones in vitro que resultan más representativas que los modelos estáticos convencionales.Su diseño permite ensayos paralelos y comparativos, aumentando re- producibilidad y reduciendo costes. Esferoides intestinales: antesala de organoides. Como paso intermedio hacia modelos más complejos, Pharmanova II ha permitido incorporar la tecnología de esfe- roides intestinales, obtenidos a partir de células humanas de carcinoma colorrectal mediante cultivo en agitación. Estos esferoi- des son estructuras tridimensionales que re- producen parcialmente la arquitectura y fun- cionalidad del tejido intestinal. La obtención y caracterización de este modelo se lleva a cabo mediante tecnologías avanzadas de cultivo celular, microscopía de fluorescencia y confocal, análisis de marcadores celulares y estudios de expresión génica en rutas infla- matorias. Además, el proyecto ha desarro- llado un modelo de esferoide inflamado, que permite evaluar el efecto de compuestos con potencial actividad antiinflamatoria en un contexto tridimensional más cercano a la fisiología intestinal. Resultados destacados Pharmanova II ha generado resultados con- cretos que evidencian la madurez de las Nuevas Metodologías Avanzadas( New Approach Methodologies (NAMs)) imple- mentadas y marcan un avance significati- vo para la aplicación de las mismas en la búsqueda de compuestos con potencial terapéutico. Un sistema de cribado celular avanzado mediante la generación de líneas celulares editadas mediante CRISPR que muestran activación específica de rutas inflamatorias, como NF-κB, y permiten discriminar com- puestos con actividad antiinflamatoria, in- cluyendo extractos validados de empresas colaboradoras como Monteloeder y Terra Nova Foods. Un modelo dinámico y 3D, el intesti- no-en-chip desarrollado y optimizado que mantiene un estado inflamado estable, lo que posibilita analizar efectos antiinflama- torios y medir parámetros fisiológicos, mo- leculares y funcionales de manera integrada. Además, de esferoides intestinales fun- cionales. los esferoides intestinales obteni- dos presentan estructuras tridimensionales organizadas, con marcadores epiteliales, que pueden responder a estímulos inflama- torios y reflejar los efectos moduladores de los compuestos candidatos. La integración de cribado celular, intesti- no-en-chip y esferoides conforma un pipe- line completo que reduce la dependencia de modelos animales y aumenta la predic- tividad preclínica. Este enfoque consolida- do permite evaluar biomoléculas de forma rápida, segura y cercana a la fisiología humana, cumpliendo con las recomen- daciones de la EMA y la SRIA europea, y generando evidencia robusta de eficacia y seguridad que respalda futuras aplicaciones terapéuticas frente a la inflamación intesti- nal y cáncer colorrectal. Impacto y conclusión La integración sistemática de Nuevas me- todologias de análisis (New Approach Methodologies (NAMs)) constituye un modelo responsable, eficiente y alineado con las estrategias regulatorias europeas. Con este proyecto Pharmanova II demues- tra que es posible incorporar tecnologías de vanguardia en investigación preclínica mediante un pipeline que combina cribado celular avanzado, sistemas dinámicos como intestino-en-chip y modelos tridimensio- nales como esferoides, cumpliendo con los principios de las 3Rs (Reemplazar, Reducir, Refinar). La adopción de modelos in vitro avanza- dos incrementa la predictividad de los resul- tados, ofreciendo datos más representativos de la respuesta real de biomoléculas en pa- cientes. Esto permite identificar de forma temprana compuestos prometedores, acelerar la innovación terapéutica y reducir el riesgo de fracaso en fases clínicas. Además, se refuerza la transferencia tec- nológica, cumpliendo con las recomenda- ciones de la SRIA europea y la EMA, y en el desarrollo y validación de NAMs aplicadas a la industria farmacéutica. En resumen, Pharmanova II ha permitido desarrollar un flujo de trabajo integral, que combina cribado celular, organ-on-chip, es- feroides y modelos predictivos, generando evidencia sólida de eficacia y seguridad. Un enfoque que impulsa la innovación respon- sable y contribuye a transformar la investi- gación farmacéutica hacia modelos más éticos, sostenibles y predictivos◉ DESARROLLO DE FÁRMACOS 40 FARMESPAÑA INDUSTRIAL · ENE/FEB 26