Revista Farmespaña Industrial Mayo - Junio 2024

microorganismos (puede incluirse una cepa procedente de la vigilancia ambiental). Vigilancia ambiental durante el llenado de los medios Todos los procesos rutinarios y normales (como la limpieza, la desinfección y el man- tenimiento) deben mantener el entorno de la sala blanca en su estado cualificado. El mantenimiento incluye la supervisión am- biental microbiológica y de partículas para demostrar que semantienen las condiciones especificadas del entorno de la sala blanca. Los resultados de la vigilancia también pue- den proporcionar información clave para in- vestigar un llenado fallido de medios. El control de partículas consiste en el control continuo de partículas en los rangos <0,5 μm y <5,0 μm, utilizando un muestreador de partí- culas acopladoauna sonda isocinética situada cerca del punto de llenado en la zona de Grado A. Debe adjuntarse un registro permanente de la impresión del contador de partículas (o una copia auténtica certificada si la impresión se realiza en papel térmico) a la APS o al registro del lote de productos. Los límites reglamenta- rios/de actuación por m 3 de volumen de aire son no más de 3.520 partículas en el rango de tamaño de partícula <0,5 μm y no más de 20 partículas en el rango <5,0 μm. Cada lote de placas demuestreo ambiental debe someterse a pruebas de esterilidad y de capacidad de promoción del crecimiento frente a las cepas compendiales de microor- ganismos recomendadas antes de autorizar su uso. Los métodos microbiológicos de- ben incluir un mapa de los lugares donde se tomarán las muestras o se expondrán las placas. Los métodos son los indicados en EudraLex, Anexo 1 actual 3 ; muestreo de aire activo (1 m 3 de volumen de muestra) en pla- cas de agar de 90 mm; placas de sedimenta- ción de 90 mm de diámetro con exposición de hasta cuatro horas (si el llenado de la APS o de producción dura más tiempo, deben exponerse nuevas placas de sedimentación para períodos posteriores de cuatro horas); placas de contacto con la superficie, de 55 mm de diámetro, que se ponen en contacto con las paredes de la sala blanca, el suelo o la vestimenta de los operadores; y muestras de placas de dedo, realizadas por los opera- dores de la sala blanca durante el período de llenado y al salir de la sala blanca (cuatro dedos y el pulgar sobre la superficie de una placa de sedimentación TSA de 90 mm). Los medios suelen ser agar triptona soja (TSA) para aerobios viables y agar sabouraud dextrosa (SDA) para hongos (mohos) y leva- duras. Las placas en contacto con la superfi- cie pueden ser TSA, que incorporan un agente neutralizante para contrarrestar los residuos de detergente de las superficies. Los residuos de agar se eliminan de los lugares de mues- treo limpiándolos con alcohol al 70 %. Los límites de acción reglamentarios para los resultados del control microbiológico de las zonas de salas blancas de grado A (LAF de grado A en entorno ambiental de grado B, RABS o aislador) en unidades formadoras de colonias, son los tabulados en EudraLex, Anexo 1 actual 3 . Las salas blancas adyacentes de grado B, C o D en las que el operador se ponga la vestimenta y se transfiera material para la APS también deben controlarse; los lí- mites reglamentarios establecidos para estos grados de salas blancas también se incluyen en EudraLex, Anexo 1 actual 3 . La frecuencia de la supervisión de las salas blancas de grado C y D se determina en función de la evaluación del riesgo para la calidad; no obstante, dicha supervisión en el momento de un llenado de medios puede ayudar a la investigación de una discrepancia o fallo. Para los llenados de medios, el número de UFC en las placas de control ambiental en las zonas de Grado A (LAF, RABS o aislador) y Grado B debe enumerarse e identificar- se hasta la especie utilizando los métodos bioquímicos o de identificación de ácidos nucleicos disponibles. Los aislados pueden compararse con los organismos de cualquier unidad contaminada. La información relati- va al número, especies y localización de los microorganismos contaminantes puede resultar crucial en la investigación de un lle- nado de medios fallido (también a partir de la supervisión de las zonas de grado C y D). Formación y cualificación del operador El personal cualificado para trabajar en la fabricación aséptica, incluido el personal de mantenimiento y calidad, debe participar en el llenado de medios. Los operadores que realicen APS y fabrica- ción aséptica deben estar formados en los procedimientos pertinentes, incluyendo el uso de vestimenta de sala blanca y el com- portamiento aséptico (así como los procedi- mientos específicos del producto): • Tras la formación teórica inicial, se debe permitir a los operadores asépticos prac- ticar sus manipulaciones en una maque- ta o en un entorno de práctica no estéril antes de participar en operaciones en sala blanca. • Los materiales y equipos estériles se ma- nipulan únicamente con instrumentos esterilizados, como pinzas. Entre usos, los instrumentos deben protegerse de la contaminación. • Tras la colocación inicial de la vestimenta, los guantes estériles se desinfectan pe- riódicamente rociándolos con un agente desinfectante cualificado, como alcohol isopropílico estéril al 70 % (IPA), para minimizar el riesgo de contaminación. El personal no debe entrar en contacto directo con productos estériles, envases, componentes o superficies críticas. • Los movimientos rápidos crean turbu- lencias que amenazan la integridad de los entornos estériles y arrastran partí- culas. Los movimientos de los operado- res deben ser lentos y deliberados y no deben interrumpir el LAF diseñado para proteger los procesos críticos. • Cuando se realicen manipulaciones asépticas (como realizar conexiones asépticas, retirar muestras o recuperar componentes caídos o atascados de una línea de llenado), los operadores deben recibir formación para acercarse al lugar lenta y deliberadamente desde un lado para evitar interrumpir la LAF. 3. Fallos en el llenado de medios – Determinación de las causas y soluciones Un paso crítico en la investigación es la identificación de las especies del microor- ganismo o microorganismos en los viales de medios positivos, y de cualquier colonia que aparezca en las placas de monitoriza- ción ambiental, particularmente las de los entornos de Grado A/B, incluyendo las de monitorización RABS/Aislador. La identifica- ción de colonias en placas expuestas en las salas blancas adyacentes de grado inferior también es crucial, ya que los materiales o el personal han accedido a las salas de llena- do a través de estas salas blancas de grado inferior. La capacidad de hacer coincidir la identificación de un aislado ambiental del lote actual (o reciente) con la identidad del organismo contaminante en las unidades de medios fallidas proporciona pistas impor- tantes para la determinación de la causa raíz. CONTROL DE CALIDAD 36 FARMESPAÑA INDUSTRIAL · MAY/JUN 24