Revista Farmespaña Industrial - Especial Cannabis Medicinal

y de 2,6 logs a 60 ºC. En este último caso, el potencial antimicrobiano del CO₂ supercríti- co se vio reforzado por la temperatura 9 . Un hecho especialmente relevante es que durante las extracciones supercríticas se lo- gró la eliminación completa de enterobacte- rias, mohos y levaduras, ya que el recuento fue cero en todos los medios (VRBG y SB) y diluciones. En cambio, en las extracciones etanólicas la inactivación de estos grupos no fue total, probablemente porque se utilizó etanol al 96 %, cuando su máxima eficacia desinfectante se alcanza al 70 %, como es bien sabido (Sauerbrei, 2020). Por último, las dificultades para eliminar todos los microorganismos en el medio PCA (véase primeras columnas Tabla 1) podrían deberse a la presencia de bacterias esporu- ladas, muy resistentes a cualquier técnica de esterilización en medios con baja actividad de agua, como el cáñamo. Análisis microbiológico de los extractos Afortunadamente, los extractos obtenidos con todas las técnicas fueron estériles, sin crecimiento detectable en ningún medio ni dilución. En las técnicas con etanol, el di- solvente tuvo que ser eliminado mediante evaporación, lo que combinó la acción del alcohol con la aplicación de calor durante largos periodos. En el caso de la extracción supercrítica, el CO₂ pasó de forma continua sobre el lecho de cáñamo, ejerciendo su co- nocida acción biocida. Además, la despresu- rización final para recuperar el extracto po- dría haber provocado la rotura de las células microbianas 10 . Estos resultados son de gran relevancia desde el punto de vista comercial, ya que incluso partiendo de cáñamo mohoso, sería posible formular extractos derivados aptos para cualquier vía de administración, gracias a la ausencia de microorganismos 6 . Influencia de la humedad del cáñamo en la extracción con CO₂ En las extracciones supercríticas, se estudió además la influencia del contenido de hu- medad del cáñamo en el contenido micro- biano residual, desde el valor inicial del 5 % (humedad en equilibrio con el ambiente) Tabla 2. Rendimiento de extracción y grado de inactivación microbiana alcanzado en el cáñamo al aumentar su humedad de partida, durante la extracción con CO 2 supercrítico aplicado a 320 bar y crecientes temperaturas Temperatura Humedad cáñamo Grado de inactivación Rendimiento de extracción (ºC) (%) (log (N/N0) (%) 40 5 -1,2 15,5 25 -1,6 19,7 35 -2,5 16,1 60 5 -2,6 15,6 25 -2,7 18,4 35 -2,8 16,1 INVESTIGACIÓN 34 FARMESPAÑA INDUSTRIAL · ESPECIAL CANNABIS MEDICAL